如何在PCR耗材中选择合适的PCR板
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如何在PCR耗材中选择合适的PCR板

时间:2021-12-09 10:22:54 点击:207 次 来源:洛阳典润科技有限公司 官网
  PCR 板通常采用96孔和384孔的形式,其次为24孔和48孔。使用的PCR仪和正在进行的应用的性质将决定PCR 板是否适合您的实验。

  裙边

  PCR 板的“裙”是板周围的板。裙边可为反应体系构建时的移液过程提供较好的稳定性,以及在进行自动机械处理时提供更好的机械强度。PCR 平板可分为无裙边,半裙边和全裙边。
  无裙边板缺少周围的面板。这种形式的反应板可与绝大多数PCR仪和实时PCR仪的模块适配,但不适用于自动化应用。
  半裙边板在板的边缘周围具有短的边缘,在移液过程中提供足够的支撑,PCR仪大多数均采用半裙边板。
  全裙边的PCR 板具有覆盖板高度的边缘面板。这种板形式适用于具有突出模块的PCR仪(可有利于自动化操作),可稳固适配。全裙边还增强了机械强度,使其非常适合在自动化工作流程中使用机器人平台。

  板面

  板的板面是指其上表面。全平面板设计适用大多数PCR仪,便于密封和处理。边缘凸起板设计对于某些PCR仪器具有好的适配性,有助于在不需要适配器的情况下平衡热盖压力,确保好的热传递和可靠的实验结果。

  颜色

  PCR板通常可提供多种不同的颜色形式,以便于对于样品的视觉区分和鉴别,特别是在高通量实验中。尽管塑料的颜色对DNA扩增没有影响,但在设置实时荧光定量PCR的反应时,与透明耗材相比,我们更使用白色塑料耗材或者经磨砂处理的塑料耗材,以实现灵敏和准确的荧光检测。
  qPCR使用透明和白色耗材的结果比较与透明孔相比,白色孔Ct值更低(灵敏度更高)。白色孔在技术重复中也表现出更高的一致性。
  白色耗材通过阻止荧光折射出管来提高qPCR数据的灵敏度和一致性。折射被Z小化时,更多的信号被反射回检测器,从而增加信噪比。此外,白色管壁可阻止荧光信号传递至PCR仪模块,避免被吸收或不一致地反射荧光信号,从而使重复实验中的差异降至Z低。

  外形(Profile)

  PCR板的外形是指其高度,因此“low profile(低容,低位)”意味着高度更低。 低容耗材更短的设计更大程度减少了反应体系上方的空间,降低了蒸发的影响并提高了热传导效率。因此,同时兼容的情况下优先选择低容耗材,即“快速”板或矮板。

  切角

  切角是对PCR板的一个角缺失,取决于所需要适配的仪器。切角可能位于96孔板的H1,H12或A12位置,或384孔板的A24位置。带有切角的PCR板ANSI/SBS形式为了兼容不同的自动化液体处理高通量系统,PCR板应符合美国国家标准协会和生物分子科学学会。符合ANSI/SBS的板具有标准的尺寸,高度,孔位置等,因而有助于于自动化处理。

  孔边缘

  PCR 板的共同特点是在孔周围有一个凸起的边缘。该设计可有助于用封板膜进行密封以防止蒸发。

  标记

  PCR板上的字母数字标记将有助于识别单个孔及对应样品的位置。通常为白色或黑色字迹的凸起字母,以便于查看。然而,在自动化流程中凸起的标记可能会干扰到密封的过程。对于自动化应用,刻字可以改善板的外边缘的密封性。

  可分割板

  某些96孔PCR板被设计成可分割的。该设计使得一整块96孔板可以轻松被分割成更小的板,在不需要使用一整块板时可减少耗材的浪费并降低成本。具有24孔分割的平板是常见的,但32孔和8孔分割也可以提供方便和灵活性。

  条形码

  在高通量实验中,半裙边和全裙边的PCR板可以标记条形码,以便于记录和跟踪。为了更为可靠地追踪,条形码标记应当不能被刮掉并能承受化学侵蚀和一定的温度范围(如–196°C至120°C)。条形码阅读器的位置可能因自动化平台而异,在这些情况下,4边条形码或自定义条码是替代解决方案。

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