核酸提取的注意事项及应对方法有哪些?
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核酸提取的注意事项及应对方法有哪些?

时间:2022-04-07 16:34:55 点击:307 次 来源:洛阳典润科技有限公司 官网

  面对纷繁复杂的样本,每天的核酸提取可以说是费时费力。如果短时间内想稳定拿到实验结果,那么快速、稳定的核酸提取方法就显得十分重要。下面典润小编就带大家来了解下核酸提取的注意事项及应对方法有哪些?

核酸提取深孔板

  比较常见的提取方法有沉淀法,离心柱法和磁珠法,提取步骤基本类似分为裂解、洗涤和洗脱。

  核酸提取需要注意的细节较多,一处出错都会导致结果的失败。常见的问题主要有产物得率低,产物降解或者试剂残留。针对这些问题,下文整理给出了具体的应对方法,帮助大家避坑。

  一、提取的核酸得率低

  1、样品量与试剂的配比要控制在一定范围,避免超过裂解能力;

  2、破碎研磨的步骤处理细节很重要,一定要充分研磨,这是核酸提取的首要条件;

  3、在洗脱的步骤,使用足量的洗脱液洗脱并充分混匀,避免有团块残存;

  4、实验耗材要匹配,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同,也会影响核酸的得率。

  二、提取核酸出现降解

  1、提取的样品量要符合试剂的配比,尽量控制样品量达到合适比例;

  2、每个步骤都要注意充分的混合均匀,避免团块的残留影响实验结果;

  3、在洗脱时,时间过长或者温度过高,核酸有可能会降解;

  4、样本切记不可反复冻融,提取的样本要注意在合适的温度保存,长期保存尽量 -80 ℃。

  三、提取到的核酸纯度不够高,甚至抑制物残留影响下游实验

  1、样本量和裂解液等试剂的配比要尽量控制到合适的范围;

  2、混合均匀以确保裂解充分和没有团块残留;

  3、晾干的步骤要充分,否则可能会导致醇类等杂质的残留;

  4、磁棒振荡幅度太小或混合时间太短,磁珠上有杂质残留会影响磁珠吸附核酸的能力。

  以上就是核酸提取的注意事项及应对方法的全部内容了,希望能够帮助到大家。洛阳典润科技有限公司是一家从事医疗耗材生产和销售的企业,可为广大朋友提供例如核酸提取用深孔板、磁套、移液器吸头、PCR耗材、试剂瓶、离心管和冻存管等耗材。有需要的话可以随时拨打下方的电话联系我们。

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